押しつぶし法で，細胞分裂を顕微鏡観察した。細胞分裂の観察は，分裂の盛んな頂端分裂組織で行う。今回はネギの種子を発芽させ，その根の先端部分を使った。
教科書などでは，細胞分裂の観察に，次のような３つの操作が説明されている。
- 細胞が変形したりしないように生命活動を停止させる操作（固定）
- 接着している細胞をばらばらにする操作（解離）
- 特定の部位に色をつけて観察しやすくする操作（染色）
そのため，酢酸につけて固定し，塩酸で煮て解離しやすくし，酢酸オルセインなどで染色したのち，指で押して解離させて観察する，といった手順が一般的だ。
今回は，染色液に塩酸を混ぜ，そこに数分浸したのち，指で押しつぶすという方法で行った。そのときの染色液や塩酸との比率，また押しつぶす前に解離させる方法などを比較・検討した。と言っても，わたしは押しつぶし法も２，３回ほどしかしたことがない。生徒レベルなので，とにかく見よう見まねでやってみた。
染色液による見え方の違いは，次のようになった。ただ，解離が不十分であったり，分裂しているところが見つけられなかったりで，単なる細胞の観察になっているものもある。ご容赦を。
酢酸オルセイン溶液
メチレンブルー溶液
酢酸カーミン溶液
シッフ溶液
シッフ溶液はアセトアルデヒドで呈色するらしい。もっと長時間浸して，液から出しておくと染色するようだが，その記録はできなかった。
続いて，もっともきれいに観察できたダーリアバイオレット溶液。この方法が今回のメインのよう。やっていて思い出したのだが，数年前に地元の先生から，この方法を紹介していただき，わたし自身もやってみたことがある。動画まで撮影したはずだ。来週，会社で確認してみようと思う。
ここで観察の方法をおさらいしよう。
これがダーリアバイオレット溶液に塩酸を加えたもの。ダーリアバイオレット溶液７に対して，１mol/L塩酸が３が加えてある。これに発根した種子を浸す。浸す時間は１０分くらいと言っていたが，実際にやってみると２，３分でも観察が可能だ。
取り出したら水で洗う。これも１，２分浸すと言っていたが，実際には３０秒ほど洗う程度でよいようだ。
それをスライドガラスに取り出す。
少し水がついているくらいがちょうどよい。水分が少ないとプレパラートがつくりにくい。少ないからと言って，水をたらすと，水が多すぎて押しつぶすときにずれてしまう。
根の先端１ｍｍ程度を切り取り，カバーバラスをかける。カバーガラスの上から，つまようじの頭（とがっていない方）で軽く何度もつつくとこんなふうに解離してくる。
さらにろ紙をのせて，カバーガラスがずれないようにまっすぐに押しつぶす。
これでプレパラートのできあがり。これを顕微鏡にセットして観察する。
ダーリアバイオレット溶液
ダーリアバイオレット溶液による方法は簡単であり，しかも非常にきれいに観察できる。
なお，この方法は，雑誌「遺伝」2000年6月号（裳華房）『実験・観察のページ／体細胞分裂の観察を確実に行う簡易染色法と材料の条件（半本秀博）』を参考にしているそうだ。この資料も入手してみたい。
